Медична генетика - В. М. Запорожан 2005

Профілактика спадкових хвороб
Методи діагностики спадкової патології в системі сучасних репродуктивних технологій
Доімплантаційна (преімплантаційна) діагностика

Сьогодні у зв’язку з розвитком методів екстракорпорального Запліднення (ЕКЗ) широкого розповсюдження набуває доімплантаційна Діагностика спадкових захворювань, мета якої — не допустити перенесення та імплантації ембріонів з серйозними генетичними захворюваннями. Така діагностика пропонується подружнім парам, які мають високий ризик народження дітей із хромосомними хворобами (пов’язаний з віком матері, носійством збалансованих хромосомних мутацій) або з моногенними хворобами.

Ідея доімплантаційної діагностики виникла давно. Ще в 1967 р. R. Edwards і R. Gardner успішно визначили стать у ембріонів кролика, що знаходилися на стадії бластоцисти, а потім перенесли їх у порожнину матки. Однак у людини методику успішно використовують з початку 90-х рр., коли стало можливим за допомогою ПЛР, а потім FISH-методу визначати Мутації в одиничних клітинах.

Суть методу полягає в такому. Після стимуляції ХГТ гіперовуляції у жінок одержують кілька овоцитів, проводять запліднення in vitro (екстракорпоральне запліднення). На 3-й день у ембріонів на стадії 5-8 клітин за допомогою мікроманіпулятора відділяють бластомер і досліджують його за допомогою FISH-методу або ПЛР. У подальшому імплантуються генетично повноцінні ембріони.

Відомо, що більшість випадків анеуплоїдій є наслідком нерозбіжності хромосом під час мейозу при овогенезі. Тому для дослідження може бути отримане полярне тільце (перше і друге). Така преімплантаційна діагностика особливо рекомендована жінкам старше 35 років, третина овоцитів яких може мати хромосомний дисбаланс.

Для діагностики хромосомних синдромів найнадійнішим для дослідження бластомерів або полярних тілець є FISH-метод, в якому використовуються ДНК-зонди для одночасного визначення хромосом 13, 18, 21, Х, Y. За допомогою спеціальних зондів може бути проведена діагностика хромосомних аберацій (якщо один із батьків є носієм збалансованої хромосомної аберації). Аналіз каріотипу одного бластомера (або полярного тільця) не виключає, проте, можливість мозаїчної форми хромосомної хвороби.

Якщо батьки мають ризик народження дитини з моногенним захворюванням, то бластомер досліджують за допомогою ПЛР. Нині проводиться доімплантаційна діагностика муковісцидозу, хвороби Тея — Сакса, гемофілії А і В, серпоподібно-клітинної анемії, таласемії, м’язової дистрофії Дюшенна, синдрому ламкої Х-Хромосоми, синдрому Марфана, хореї Гентінгтона та інших захворювань.

Поки проводиться аналіз клітини, зародок продовжує розвиватися в штучних умовах (він може бути заморожений у рідкому азоті). Статеві клітини людини і ранні ембріони після розморожування добре зберігають життєздатність. Підсадка після заморожування може бути зроблена під час будь-якого іншого оваріального циклу, не обов’язково в той місяць, коли взята яйцеклітина. Імплантуються тільки генетично повноцінні ембріони.