БІОХІМІЯ - Підручник - Остапченко Л. І. - 2012

Розділ 7. ЕНЗИМОЛОГІЯ

7.5.Основи кінетики ферментативних реакцій

7.5.1.Залежність швидкості ферментативної реакції від концентрації ферментів

При проведенні ферментативної реакції в умовах надлишку субстрату швидкість реакції буде залежати від концентрації ферменту. Графічна залежність такої реакції має вигляд прямої лінії (рис. 7.16).

Class="center">

Рис. 7.16. Залежність швидкості ферментативної реакції від концентрації ферменту

Проте кількість ферменту часто неможливо визначити в абсолютних величинах, тому на практиці використовують умовні величини, які характеризують активність ферменту: одна міжнародна одиниця активності (МО) відповідає такій кількості ферменту, яка каталізує перетворення 1 мкмоль субстрату за 1 хв за оптимальних умов проведення ферментативної реакції. Оптимальні умови індивідуальні для кожного ферменту й залежать від температури середовища, рН розчину за відсутності активаторів та інгібіторів:

Кількість одиниць активності (пМО) визначають за формулою

МО _ кількість перетвореного субстрату (мкмоль)

час (хв)

У 1973 р. було прийнято нову одиницю активності ферментів: 1 катал (кат), що відповідає такій кількості каталізатора, яка перетворює 1 моль субстрату за 1 с. Кількість каталів визначають за формулою

Міжнародна одиниця ферментативної активності МО пов'язана з каталом наступними рівностями:

1 кат = 1 моль S/с = 60 моль S/хв = 60·10⁶ мкмоль/хв = 6·10⁷ МО,

1 МО = 1 мкмоль/хв = 1/60 мкмоль/с = 1/60 мк кат = 16,67 нкат.

У медичній і фармацевтичній практиці для оцінки активності ферментів часто використовують міжнародні одиниці активності - МО. Для оцінки кількості молекул ферменту серед інших білків даної Тканини визначають питому активність (ПА) ферменту, що чисельно дорівнює кількості одиниць активності ферменту (nМО) у зразку тканини на масу [мг] білка в цій тканині:

За питомою активністю оцінюють очищення ферменту: чим менше сторонніх білків, тим вища питома активність.