Химия белка. Структура, свойства, методы исследования - Шендрик А.Н. 2022

Методы экспериментального исследования структуры белков
Методы разделения белков
Экспериментальные методы электрофореза - Электрофорез в полиакриламидном геле

Электрофорез в полиакриламидном геле является чрезвычайно полезным методом в биохимических исследованиях и применяется для разделения, очистки, оценки чистоты и молекулярной массы белков.

Полиакриламидный гель получают сополимеризацией акриламида с N,N-метилен-бис-акриламидом:

Реакция полимеризации протекает по радикально-цепному механизму. Степень сшивки регулируют количеством бис-акриламида. Чем больше его концентрация, тем меньше размер пор.

Гель полиакриламидной матрицы в виде однородного тонкого слоя можно сформировать между двумя пластмассовыми пластинками или же в стеклянной трубочке. ПААГ характеризуется развитой пористостью, и частицы, двигаясь через тонкий слой в электрическом поле распределяются в соответствии с отношением Q/r (см. выше).

Электрофорез в ПААГ относится к простым и удобным в подготовке, высокочувствительным методам. При его проведении не происходит повреждений нестойких белковых молекул, что часто присуще другим методам. Он позволяет с хорошей эффективностью разделять на индивидуальные компоненты сложные смеси.