Аминокислоты, пептиды и белки - Дэвени Т., Гергей Я. 1976

Методы иммунохимического анализа
Анализ белков методами диффузии в геле
Электросинерез

Принцип метода. Это один из методов иммунодиффузии, в котором антиген и иммунная сыворотка мигрируют в геле навстречу друг другу не за счет диффузии, а под влиянием электрического поля.

Область применения. Анализ антигенов, обладающих низким коэффициентом диффузии.

МЕТОДИКА

1. Приготовление агаровой пластинки (см. стр. 138).

2. Примерно в середине агаровой пластинки вырезают две круглых лунки диаметром около 5 мм на расстоянии 2—3 см одну от другой. Лунка, расположенная ближе к катоду, предназначена для раствора антигена, а лунка, расположенная в анодной части геля, — для иммунной сыворотки. Непосредственно перед заполнением лунок в каждую из них вносят несколько капель расплавленного агара.

3. После внесения раствора антигена и иммунной сыворотки проводят Электрофорез (см. стр. 139) до тех пор, пока в геле между двумя лунками не образуются полосы преципитации.

ПРИМЕЧАНИЯ

1. Под влиянием электрического поля Антитела (Иммуноглобулины) мигрируют в сторону катода. Если исследуемые Антигены (например, Белки сыворотки крови) при электрофорезе движутся к аноду, то реакция антиген—антитело происходит в геле между двумя лунками.

2. Электросинерез можно комбинировать с иммуноэлектрофорезом. Для этого после проведения электросинереза на небольшом расстоянии от лунок, заполненных антигеном и антисывороткой, в геле вырезают канавку (см. стр. 137), которую заполняют соответствующей иммунной сывороткой.