Практическая химия белка - А. Дарбре 1989

Анализ аминокислотной последовательности на микроуровне с использованием газофазного пептидо-белкового секвенатора
Очистка полипептида для микроанализа
Реактивы и материалы

Использовались акриламид, N,N'-метиленбисакриламид и ДСН фирмы Bio-Rad Laboratories, кумасси бриллиантовый голубой фирмы Serva. Для элюирования и электрофоретического концентрирования белка использован ДСН, перекристаллизованный из этанола после обработки активированным углем при 50 °С. Качество других реактивов также должно быть наилучшим из всех доступных. Диализные мембраны марки Spectrapor (фирма Spectrum Medical Industries) очищали нагреванием при 60 °С в течение 30 мин последовательно в 1%-ном растворе бикарбоната натрия, дистиллированной воде и 0,1%-ном растворе ДСН. Подготовленные мембраны хранились при комнатной температуре в свежем 0,1%-ном растворе ДСН, содержащем 0,02% азида натрия.

Class="center">

РИС. 17.5. Выходы ФТГ-VaI, Leu, Ala при анализе N-концевой последовательности 10 пмоль апомиоглобина кашалота. Для каждого производного выходы нормированы по стандартной смеси ФТГ-производных аминокислот.