Практическая химия белка - А. Дарбре 1989

Методы твердофазного анализа аминокислотной последовательности
Отщепление на твердофазном секвенаторе
Отщепление анилинотиазолинона

В твердофазном методе для циклизации применяется ТФУ. Важное значение имеет время реакции отцепления, количество добавляемой кислоты: короткое время отщепления приводит к неполной циклизации, длительное — вызывает неспецифическое расщепление пептидных связей и рост загрязнения отщепленных тиазолинонов. Рекомендуется проводить циклизацию в течение 8 мин при 45 °С. Оптимальное время добавления кислоты можно определить, используя брадикинин, имеющий остатки пролина в положениях 2, 3 и 7. Время реакции считается достаточным, если в четвертом цикле отщепления содержится не более 10% остаточного пролина. Кроме того, выход третьего остатка пролина (седьмая N-концевая аминокислота) не должен резко упасть по сравнению с содержанием предыдущих остатков, пролина. Отщепление при помощи ТФУ становится более эффективным, если перед добавлением кислоты колонку продуть азотом [43].



Последнее обновление: 05/02/2024

Редакционная и учебная адаптация: Данный материал сведен на основе первоисточника/оригинального текста. Команда проекта осуществила редакционную обзорную обработку, исправление технических неточностей, структурирование разделов и адаптацию содержания к учебному формату.

Что было обработано:

  • устранение форматных дефектов (OCR-ошибки, разрывы структуры, дефектные символы);
  • редакционное упорядочивание содержания;
  • унификация терминов в соответствии с академическими источниками;
  • проверка соответствия фактических утверждений текста первоисточнику.

Все упоминания об авторе, годе издания и происхождении первичного текста сохранены в соответствии с источником.