Практическая химия белка - А. Дарбре 1989

Методы твердофазного анализа аминокислотной последовательности
Отщепление на твердофазном секвенаторе
Колонка

Конструкция прибора описана ранее [27—29, 35].

Оба конца тонкой стеклянной трубки (длина 230 мм, внутренний диаметр 2,5 мм) полируют до получения ровной поверхности торца. Материалом соединений служит тефлон и кель F [27]. Колонку помещают в обогреваемый алюминиевый блок, термостатированный при 45 °С.

12.5.1.1. Микроколонка. Для анализа пептидов в количестве <20 нмоль используются колонки уменьшенного размера (например, 15X2 мм), заполненные шариками пептидилстекла, смешанными со стеклом-наполнителем. Известна конструкция колонки, сделанной из тефлоновой трубки (рис. 12.4), внутренний объем которой соответствует количеству используемого пептидилстекла. Под нижний суженный конец трубки помещен пористый тефлоновый фильтр (размер пор 2 мкм), лежащий в адапторе, закрывающем конец колонки. Мертвый объем вверху колонки уменьшен введением короткого отрезка узкой тефлоновой трубки. Колонка в сборке помещена в стеклянный термостат (рис. 12.6).

РИС. 12.4. Колонка для анализа пептидов на микро- уровне. Материал колонки — тефлоновая трубка, внутренний объем которой зависит от количества используемого носителя. В верхнюю часть колонки введена узкая тефлоновая трубка, нижний конец колонки закрыт пористым тефлоновым фильтром с диаметром пор 2 мкм (фирма Zitex, Chemplast Inc.). Колонка помещена в термостатированную стеклянную трубку (см. рис. 12.1) [52, 69].