Практическая химия белка - А. Дарбре 1989

Аналитические методы
Определение белка, присоединенного к твердому носителю
Определение аминогрупп реакцией с хлоранилом

Это быстрый метод обнаружения свободных аминов и первичных или вторичных аминогрупп на смоле может быть использован для контроля полноты протекания реакции конденсации в твердофазном синтезе пептидов или при блокировании аминогрупп.

Реагенты.

Насыщенный раствор хлоранила (2,3,5,6-тетрахлоро-1,4-бензохинон) в толуоле.

Методика.

1. Помещают в небольшую пробирку 1 мг смолы с пептидом.

2. Для обнаружения первичных аминогрупп добавляют 200 мкл ацетальдегида, для вторичных — 200 мкл ацетона.

3. Приливают 50 мкл раствора хлоранила и размешивают 5 мин при комнатной температуре.

В присутствии свободных аминогрупп на поверхности смолы образуется зеленая или голубая окраска. Чувствительность 5 мкмоль/г смолы, т. е. приблизительно такая же, как у нингидриновой реакции.



Последнее обновление: 05/02/2024

Редакционная и учебная адаптация: Данный материал сведен на основе первоисточника/оригинального текста. Команда проекта осуществила редакционную обзорную обработку, исправление технических неточностей, структурирование разделов и адаптацию содержания к учебному формату.

Что было обработано:

  • устранение форматных дефектов (OCR-ошибки, разрывы структуры, дефектные символы);
  • редакционное упорядочивание содержания;
  • унификация терминов в соответствии с академическими источниками;
  • проверка соответствия фактических утверждений текста первоисточнику.

Все упоминания об авторе, годе издания и происхождении первичного текста сохранены в соответствии с источником.