Аминокислоты, пептиды и белки - Дэвени Т., Гергей Я. 1976

Гель-фильтрация белков и пептидов
Концентрирование белковых растворов с помощью сефадекса

Принцип метода. Сухой сефадекс, добавленный к раствору который нужно сконцентрировать, благодаря высокой гидрофильности интенсивно поглощает воду; при этом остающиеся в растворе высокомолекулярные соединения концентрируются.

Область применения. Концентрирование фракций, полученных при хроматографии, белков, выделенных другими методами фракционирования, биологических жидкостей и т. д.

МЕТОДИКА

К раствору, который должен быть сконцентрирован, добавляют сухой сефадекс G-25 (крупнозернистый), суспензию тщательно перемешивают и через 10 мин. центрифугируют или фильтруют. Каждый грамм сухого сефадекса G-25 поглощает примерно 2,5 г воды. После обработки сефадексом фильтрат или надосадочная жидкость становятся благодаря этому более концентрированными, чем исходный раствор, а pH и Ионная сила их практически не меняются.

ПРИМЕЧАНИЯ

1. Однократное проведение описанной процедуры позволяет сконцентрировать раствор примерно в 3 раза. Если необходимо дальнейшее концентрирование, то процесс повторяют со свежей порцией сухого сефадекса.

2. Отмытый и высушенный сефадекс можно вновь использовать для концентрирования растворов.