Аминокислоты, пептиды и белки - Дэвени Т., Гергей Я. 1976

Анализ концевых групп и ступенчатая деградация белков и пептидов
Определение N-концевых групп 2,4-динитрофторбензольным методом
Приготовление ДНФ-аминокислот

При встряхивании смеси ДНФБ и аминокислот в спиртовом щелочном растворе образуются ДНФ-производные аминокислот.

Методика

10 ммолей Аминокислоты растворяют или суспендируют в 40 мл воды и добавляют 2 г безводного Nа2СO3. Раствор нагревают до 40° С и добавляют 10 ммолей ДНФБ. Реакция заканчивается за 30— 50 мин, на что указывает полное растворение компонентов реакционной смеси. Смесь подкисляют, добавляя несколько капель концентрированной НСl. ДНФ-аминокислоты перекристаллизовывают из соответствующих растворителей (табл. 11).

Class="center">Таблица 11 Растворители для перекристаллизации ДНФ-аминокислот

ДНФ- аминокислота

Растворитель

Ала, Цис, (Цис)2, Фен, Глу, Мет, Лей, иорВал, оксиПро, Про, Тре, Вал

Эфир — петролейний эфир

Асн, Гли, Глу, Сер

Метанол — Вода

Apr, Гис

Ацетон — вода

Лиз, Тир, Три

Ацетон — эфир

ß-Ала

Этанол — вода

ПРИМЕЧАНИЯ

Некоторые аминокислоты при подкислении отделяются в виде маслообразного материала, который осаждается ацетоном. Полученную суспензию разводят ацетоном, обезвоживают безводным Na2SO4, отфильтровывают, большую часть ацетона упаривают, а ДНФ-аминокислоту осаждают бензолом и петролейним эфиром. Если материал еще имеет маслянистую консистенцию, всю процедуру повторяют. Осадок ДНФ-аминокислот перекристаллизовывают из соответствующего растворителя.



Последнее обновление: 05/02/2024

Редакционная и учебная адаптация: Данный материал сведен на основе первоисточника/оригинального текста. Команда проекта осуществила редакционную обзорную обработку, исправление технических неточностей, структурирование разделов и адаптацию содержания к учебному формату.

Что было обработано:

  • устранение форматных дефектов (OCR-ошибки, разрывы структуры, дефектные символы);
  • редакционное упорядочивание содержания;
  • унификация терминов в соответствии с академическими источниками;
  • проверка соответствия фактических утверждений текста первоисточнику.

Все упоминания об авторе, годе издания и происхождении первичного текста сохранены в соответствии с источником.