БИОХИМИЯ - Основные регуляторы и биологические жидкости человеческого организма - 2016 год

2. ГОРМОНЫ

2.12. Практическая часть. Изучение качественных реакций на гормоны

2.12.4. Качественные реакции на стероидные гормоны

Половые гормоны играют важную роль в обмене веществ и способствуют возникновению вторичных половых признаков. Они вырабатываются половыми железами - семенниками и яичниками.

К важнейшим женским половым гормонам относятся эстрадиол, эстрон (фолликулин) и эстриол.

К мужским половым гормонам относятся андростерон и тестостерон.

Опыт 7. Реакция на фенольную группу эстрона

При взаимодействии эстрона и серной кислоты образуется соединение соломенно-желтого цвета, которое при нагревании становится оранжевым.

Для приготовления спиртового раствора фолликулина (эстрона) содержимое 5 ампул 0,1 % масляного раствора фолликулина для инъекций выливают в делительную воронку, содержащую 50 мл этанола. Воронку встряхивают и после расслоения фаз нижний слой (масляный) отбрасывают, а для исследования используют верхний слой (спиртовый раствор).

В сухую пробирку вносят 5 капель спиртового раствора фолликулина и помещают ее на 5 минут в кипящую водяную баню (для испарения спирта). Добавляют в пробирку 1 мл концентрированной серной кислоты (Н2SO4) и вновь ставят ее на 3 - 5 минут в кипящую водяную баню. Наблюдают за изменением окрашивания содержимого пробирки.

В отчете следует описать свои наблюдения. Сделать вывод о способности фолликулина взаимодействовать с серной кислотой.

Опыт 8. Реакция на 17-кетогруппу эстрона и на 17-кетостероиды, содержащиеся в моче

17 - Кетостероиды являются конечным продуктом обмена гормонов коры надпочечников: 17- α – окси - 11 - дезоксикортикостерона, кортизона, гидрокортизона и частично половых гормонов. У здоровых женщин за сутки с мочой выделяется 6 - 15 мг кето- стероидов, а у мужчин – 15 - 25 мг. Выделение 17 - кетостероидов существенно снижается при некоторых заболеваниях гипофиза, при болезни Аддисона, при недостаточной функции семенников у мужчин и увеличивается при опухолях семенников (до 1500мг/сут), надпочечников (до 2000 мг/сут), а также при акромегалии. В состоянии стресса (напряжения) повышается содержание кортикостероидов в крови и увеличивается их выделение с мочой.

Экскреция гормонов и их метаболитов при физических нагрузках обычно повышается, причем при равных нагрузках у более тренированных лиц этот процесс менее выражен, чем у малотренированных. Однако при нагрузках, близких к пределу, выделение гормонов тем больше, чем выше тренированность. Снижение выделения гормонов является неблагоприятным признаком, свидетельствующим о перенапряжении и близящемся исчерпании резервных возможностей организма.

В основе метода определения 17-кетостероидов лежит их способность образовывать с м - динитробензолом в щелочной среде продукты конденсации вишнево-красного цвета. Интенсивность окраски пропорциональна количеству 17-кетостероидов, находящихся в моче.

В одну пробирку вносят 5 капель спиртового раствора фолликулина, а в другую - 5 капель мочи и добавляют в них по 5 капель 30 % раствора гидроксида натрия (NаОН) и 2 % раствора м - динитробензола - 1.3(NO3)2C6Н3 - в этаноле. Перемешивают содержимое встряхиванием и наблюдают за развитием характерного окрашивания в каждой пробирке.

В отчете отметить изменение окраски растворов, ее интенсивность. Сделать вывод о взаимодействии 17 - кетостероида фолликулина с м - динитробензолом в присутствии гидроксида натрия. Обнаружены ли 17 - кетостероиды в моче, о чем это говорит?